青蒿琥酯-生物素（Biotin-Artesunate）的制備主要基于青蒿琥酯的羧基與生物素的氨基之間的化學偶聯(lián)反應，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。以下是其制備方法的詳細介紹：

一、制備原理

青蒿琥酯的C-12羧基或半酯可通過碳二亞胺（如EDC、DCC）與N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）活化，形成親電中間體（ART-CO-NHS）。生物素末端氨基對該活化酯進行親核攻擊，生成穩(wěn)定的酰胺鍵（ART-CONH-Biotin），同時釋放NHS。

二、制備步驟

1. 選擇生物素衍生物：
   根據(jù)實驗需求，選擇適合的生物素衍生物，如NHS-生物素、HZ-生物素等。

2. 活化青蒿琥酯：

• 將青蒿琥酯溶于干燥的極性有機溶劑（如DMF或DMSO）中。

• 加入EDC與NHS（或DCC/NHS），在避光條件下活化青蒿琥酯的羧基，生成ART-NHS酯中間體。

• 反應時間約1-2小時，需嚴格控制溫度（室溫或略低溫）以保護青蒿琥酯的內(nèi)過氧橋結(jié)構(gòu)。

3. 偶聯(lián)反應：

• 在緩沖體系（如pH 7-8的磷酸鹽緩沖液）或有機溶劑中，加入生物素胺。

• 緩慢攪拌使生物素胺與活化ART-NHS酯反應，室溫或略低溫條件下反應數(shù)小時至過夜，確保反應充分。

• 反應完成后，加入少量水或乙醇終止反應，并去除未反應的試劑。

4. 純化與驗證：

• 初步純化：通過沉淀、固相提取或薄層層析（TLC）去除未反應的生物素或青蒿琥酯。

• 高效純化：使用反相高效液相色譜（RP-HPLC）或硅膠柱層析進行分離，獲得高純度Biotin-Artesunate。洗脫體系可采用水-乙腈梯度，產(chǎn)物通過UV-Vis檢測（青蒿琥酯吸收峰約210-260 nm）進行監(jiān)控。

• 產(chǎn)物干燥：純化后的產(chǎn)物通過冷凍干燥獲得固體，避光低溫保存以保證化學穩(wěn)定性和生物活性。

• 結(jié)構(gòu)驗證：通過質(zhì)譜確認分子量，檢測青蒿琥酯核及生物素端的化學位移變化，確認酰胺鍵形成；利用親和素標記檢測生物素功能，確認結(jié)合能力和活性暴露。

三、制備條件優(yōu)化

• 反應條件：
  偶聯(lián)反應通常在中性或弱堿性緩沖體系（pH 7-8）中進行，以保證胺基未質(zhì)子化，提高親核性。青蒿琥酯羧基位點單一，偶聯(lián)反應可實現(xiàn)高度選擇性。反應條件溫和，避免青蒿琥酯內(nèi)過氧橋被還原或降解。偶聯(lián)反應可在極性有機溶劑（如DMF、DMSO）或水/有機混合體系中進行。

• 純化流程：
  通過優(yōu)化純化流程（如選擇合適的層析條件和洗脫體系），可獲得高純度、高功能化的Biotin-Artesunate。

關于我們:

陜西星貝愛科生物科技經(jīng)營的產(chǎn)品種類包括有：合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、近紅外熒光染料、活性熒光染料、熒光標記物、蛋白交聯(lián)劑、小分子PEG衍生物、點擊化學產(chǎn)品、樹枝狀聚合物、環(huán)糊精衍生物、大環(huán)配體類、熒光量子點、透明質(zhì)酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳納米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二氧化硅，聚合物微球，近紅外熒光染料，聚苯乙烯微球，上轉(zhuǎn)換納米發(fā)光顆粒，MRI核磁造影產(chǎn)品，熒光蛋白及熒光探針等等。

溫馨提示：供應產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體！

相關產(chǎn)品：

生物素化殼聚糖，Biotin-Chitosan

生物素標記丙酮酸，Biotin-Pyruvic acid

生物素標記(+)-DELTA-生育酚

萬古霉素-生物素，Vancomycin-Biotin

藻紅蛋白-生物素，C-PHYCOCYANIN-Biotin

鄰苯二酚-生物素，Catechol-Biotin

HSA-Biotin，人血清白蛋白標記生物素

生物素-膽汁酸，Biotin-Cholic acid

Biotin-Hinokitiol，生物素修飾檜木醇