Diazo Biotin-PEG3-DBCO 是一種結(jié)合重氮基團(tuán)、生物素、三聚乙二醇（PEG3）和二苯并環(huán)辛炔（DBCO）的多功能生物偶聯(lián)試劑，以下是對其的詳細(xì)介紹：

一、基本信息

• 英文名稱：Diazo Biotin-PEG3-DBCO

• 中文名稱：重氮生物素-三聚乙二醇-二苯并環(huán)辛炔

• 分子式：C52H60N8O9S

• 分子量：973.16

• 外觀：白色或淡黃色固體

結(jié)構(gòu)式：

二、化學(xué)結(jié)構(gòu)與功能

1. 重氮基團(tuán)（Diazo）：

• 具有高反應(yīng)活性，可以與多種生物分子發(fā)生反應(yīng)，如與含氮基團(tuán)（如胺基）反應(yīng)，形成穩(wěn)定的偶聯(lián)產(chǎn)物。

• 重氮基團(tuán)還可通過光活化或加熱與碳?xì)滏I發(fā)生插入反應(yīng)，常用于標(biāo)記或偶聯(lián)靶分子。

2. 生物素（Biotin）：

• 具有與鏈霉親和素或抗生物素蛋白強(qiáng)力結(jié)合的能力，用于生物標(biāo)記和分子捕獲。

3. 三聚乙二醇（PEG3）：

• 提供了柔性和間隔功能，有助于增加偶聯(lián)物的溶解度和穩(wěn)定性。

• 減少非特異性結(jié)合和聚集，提高分子的生物相容性。

4. 二苯并環(huán)辛炔（DBCO）：

• 一種對疊氮基團(tuán)（Azide）具有高度親和力的環(huán)辛炔衍生物，用于點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)（click chemistry）。

• DBCO可以與疊氮基團(tuán)進(jìn)行無銅點(diǎn)擊反應(yīng)（copper-free click reaction），在溫和條件下高效生成穩(wěn)定的三唑環(huán)結(jié)構(gòu)。

三、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 生物標(biāo)記：

• 可用于蛋白質(zhì)、抗體、核酸等生物大分子的標(biāo)記和偶聯(lián)。

• 通過重氮基與蛋白質(zhì)中的酪氨酸殘基發(fā)生共價(jià)結(jié)合，將生物素和DBCO基團(tuán)引入蛋白質(zhì)，修飾后的蛋白質(zhì)可以用于后續(xù)的生物正交反應(yīng)。

2. 點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)：

• 由于含有DBCO基團(tuán)，該試劑可以與含疊氮化物的分子進(jìn)行無銅點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)生物分子間的偶聯(lián)。

3. 細(xì)胞表面標(biāo)記：

• 通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，將生物素標(biāo)記到細(xì)胞表面特定分子，用于流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡觀察。

4. 藥物遞送系統(tǒng)：

• 作為連接器，將藥物分子與載體（如納米顆粒、脂質(zhì)體）相連，提高藥物的靶向性和生物相容性。

5. 生物傳感器的開發(fā)：

• 利用其生物標(biāo)記和點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)的特性，開發(fā)高靈敏度的生物傳感器，檢測金屬離子、有機(jī)分子或生物分子。

6. ADC合成：

• 是一種可降解（cleavable）的含3個(gè)單元PEG的ADC linker，可用于合成抗體偶聯(lián)活性分子（ADC）。

7. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究：

• 可用于蛋白質(zhì)的富集、分離和鑒定等研究。

四、操作與儲(chǔ)存

1. 溶解性：

• 在有機(jī)溶劑如DMSO、DMF中良好溶解，PEG鏈提高了在水中的溶解性。

2. 儲(chǔ)存條件：

• -20℃避光保存，避免頻繁解凍，儲(chǔ)存時(shí)間為1年。

3. 操作注意事項(xiàng)：

• 重氮基反應(yīng)：可通過光活化或加熱與碳?xì)滏I（如酪氨酸殘基）發(fā)生插入反應(yīng)，需控制反應(yīng)條件以確保特異性。

• 點(diǎn)擊反應(yīng)：DBCO基團(tuán)與疊氮基團(tuán)快速特異性結(jié)合，生成穩(wěn)定三唑環(huán)，需控制溫度、時(shí)間等條件以確保反應(yīng)效率。

• 毒性：操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備（如手套、護(hù)目鏡），以防止試劑對皮膚和眼睛的刺激。

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