巰基修飾的辣根過(guò)氧化物酶（HRP-SH）是一種經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的辣根過(guò)氧化物酶，其分子中引入了巰基（-SH）。以下是其詳細(xì)介紹：

結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

辣根過(guò)氧化物酶是一種含四個(gè)二硫鍵的單鏈多肽，由無(wú)色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白，含18%碳水化合物。巰基通過(guò)與HRP分子中的特定基團(tuán)反應(yīng)而結(jié)合，形成HRP-SH復(fù)合物。

制備方法

• 化學(xué)修飾法：通過(guò)特定的化學(xué)試劑與辣根過(guò)氧化物酶反應(yīng)，引入巰基。例如，使用2-亞氨基硫烷鹽酸鹽與辣根過(guò)氧化物酶在適當(dāng)?shù)木彌_液中反應(yīng)，生成巰基修飾的HRP。

• 試劑盒法：如Abbkine的LliKine™辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)試劑盒，提供了一種簡(jiǎn)單快速的方案，將HRP直接偶聯(lián)到含有自由氨基的蛋白質(zhì)、多肽或其他配體上。

功能特性

• 催化活性：HRP-SH保留了辣根過(guò)氧化物酶的催化能力，能夠催化多種底物的氧化反應(yīng)，如在過(guò)氧化氫存在下，催化底物產(chǎn)生顏色變化或化學(xué)發(fā)光信號(hào)。

• 反應(yīng)性基團(tuán)：巰基作為反應(yīng)性基團(tuán)，能夠與其他含有活性基團(tuán)的分子發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合。例如，巰基可以與馬來(lái)酰亞胺基團(tuán)反應(yīng)，用于標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)或其他生物分子，實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大和檢測(cè)。

應(yīng)用領(lǐng)域

• 免疫檢測(cè)：在酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、免疫印跡（Western blot）、免疫組化等實(shí)驗(yàn)中，HRP-SH可作為標(biāo)記酶，與抗體結(jié)合，用于檢測(cè)抗原或抗體的存在和含量。

• 生物傳感器：可用于構(gòu)建生物傳感器，通過(guò)與目標(biāo)生物分子結(jié)合，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)變化，用于檢測(cè)生物分子、藥物和環(huán)境污染物等。

• 化學(xué)合成：巰基可以參與多種化學(xué)反應(yīng)，如縮合反應(yīng)和還原反應(yīng)，為藥物合成和材料科學(xué)提供多種合成路徑。

注意事項(xiàng)

• 保存條件：HRP-SH應(yīng)在冷藏條件下（-20℃）保存，以保持其活性和穩(wěn)定性。

• 使用前處理：使用前需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?，如溶解、稀釋等，并注意避免反?fù)凍融。

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